很多ELISA试验新手客户都会咨询我司技能能否把全血提取出来放-70℃条件保存,等试验展开了(比方一个月左右的时刻)再离心全血取血清或许血浆做ELISA试验?这种做法我司技能都是持反对主张的。至于冻存后的全血不能够再提取血清、血浆样本来做elisa的详细原因如下:
1.全血冻存后解冻,用常规离心方法提取血清仍然是能够的,晦气的一点是,随同冻融的进程,会呈现比较严重的溶血事情。然后提取出来的血清能否做elisa,主要取决于溶血程度、你所要检测的目标蛋白的性质及你试验的意图。
2.溶血释放的胞内组分往往容易影响本底,甚至呈现假阳性;而蛋白酶的释放或许导致意图蛋白的降解影响成果;意图蛋白的巨细、稳定性、特异性(相对抗体而言)又影响其本身与酶标板的吸附、本身降解、本身与抗体的结合率等等。
以上各种不确定性要素存鄙人,假如你只是对血清中某种血清蛋白做定性检测的话,做elisa应该问题不大;若是定量分析的话,从可靠性的角度上看,不主张该做法。
与此同时,也是明确要求我司销售人员在与客户售前沟通时主张教师全血样本提取好了应该及时离心出血清或许血浆。并要求-70℃条件下保存,假如一个月左右能够展开试验能够-20℃保存,期间不能重复冻融。