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晶抗生物带您了解细胞培养使用血清应注意哪些问题

人阅读 发布时间:2024-01-03 09:50

血清的质量,种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长,而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同,尤其是对克隆细胞的生长,某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。注意以下几点:

1.需要长期保存的血清必须储存于-20°C或- 80°C低温冰箱中。4°C冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱,必须预留定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。血清在冻入低温冰箱,必须预留定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

2.Cyagen提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内起过滤,切勿直接过滤血清.否则会导致营养物质的流失!

3.瓶装血清解冻需采用逐步解冻法: -20 °C或-80 °C低温冰箱中的血清放入4°C冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20 °C进入37°C解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。影响使用效果!

4.血清中的沉淀物
絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理。显微镜下“小黑点”:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”.常误认为血清受污染。般情况下,此小黑点不会影响细胞生长。

5.切勿将血清在379C放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。

6.热灭活是指56°C, 30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中須規則搖晃均勻。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement )灭活。除非必须,般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。

补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。Cyagen提供的血清是经过严格处理可以直接使用,不需要特殊的处理,就能够维持良好的支持效果。

上海晶抗生物工程有限公司成立之初,获得国内外同行的大力支持,公司为了感恩于同行无私的帮助,时刻铭记回报社会。公司专注于生物、生化领域产品销售,有ELISA试剂盒、抗体、标准品、对照品、细胞、血清、培养基等生化产品。

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