上海晶抗生物:关于提取牛血清白蛋白及储存的方法
635 人阅读发布时间:2022-05-06 09:19
关于提取牛血清白蛋白及储存的方法
提取办法:
1、盐析
取小牛血清0.5ml+ PBS液0.5mI+饱和硫酸铵2.3ml ,充分觳杂匀称,静置20min , 2500r/min离心10min。
2、透析
取玻璃纸张,折成袋形,将离心后的上清液倒入袋内,用线扎紧上口(过细要留有清闲) ,放入有自来水的小烧杯中透析,要不断震动,每隔2min换次水,换15次。放入试管待用。

3、准备与电泳
(1)取两条2.5cm x 8.0cm的膜条,将膜条无光辉面向下,放入作育皿中的缓冲液冲锋渗透。
(2)将充分渗透的两条膜条取出,肝净滤纸吸去多余的缓冲液,以醋纤膜的光辉面距端1 5cm处作为点样线,并用铅笔在上面编好号①②。
(3)用两个点样器分别在标准液和测定液中構下,点样器下端粘上薄层标准液和样液,然后将点样器竖直,举行点样。
(4)电泳将点样后的膜条置于电泳槽架上,组织时点样面向下(无光辉面),点样端置于阴,膜条与滤纸贴紧,待平衡5min后,即可通电。调治电泳仪,使南北间距的电压为1 5v/cm ,电流0.4~0.6Ma/cm膜条,通电50分钟封闭电源。
(5)通电结束后,用镊子取出膜条,直接浸于盛有氨基10B的染色液中,染2min取出,立刻浸于漂洗液中,分别在漂洗液中各漂洗5min,直至布景漂净为止。肝滤纸吸干薄膜。
(6)观察两张薄膜的色彩。
储存办法:
每10克加100升水进行溶解,或用PBS溶解也可,视用处而决议。然后分装成小支。若不运用防腐剂可储存在零下20或30摄氏度的恒温柜中,若运用防腐剂则可储存在零上4摄氏度的环境下。
关于提取牛血清白蛋白及储存的方法!为感谢新老顾客对我司长期以来的支持与厚爱,我们将以更真诚的服务更好的产品服务于广大科研爱好者!