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哪些原因会导致Elisa试剂盒溢值?

人阅读 发布时间:2021-01-26 12:24

Elisa试剂盒适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型,Elisa试剂盒试验过程繁琐,为什么ELISA会出现“溢值”的现象呢,下面我们来仔细说说。
 
① 样品/标准品不正确稀释。
 
② 孵育时刻/温度不正确。
 
ELISA试剂盒在孵育时为盖上酶联板覆盖物:在孵育时需盖上酶联板覆盖物,以避免液体蒸腾或孵育期间的污染。每个试剂盒内均有满足数量的酶联板覆盖物。

④ 检测波长不正确:要确保分光光度剂的检测波长是正确的。
 
⑤ TMB底物的显色时刻过长:请监控显色时刻。阐明书中所示的显色时刻或许因为温度和其它检测条件的不同而稍有变化。
 
⑥ 样品不适合此检测:在阐明书中会列出每种产品的适用标本范围,超出范围的标本或许不适于此试剂盒或者检测条件需要探索。
 
⑦ 样品/标准品污染:样品或标准品的污染或许会导致检测成果“溢值”。
 
⑧ 巧合试剂不正确稀释:要严厉依照说明书来稀释巧合试剂,浓度过高会形成OD的“溢值”HRP巧合试剂的不正确稀释
 
⑨ 所用稀释液不对: ELISA试剂盒只能运用相应试剂盒内的稀释液稀释样品和标准品。
 
ELISA试剂盒的特有优势如下:
 
1、参与反应的生物素化酪胺总量与微孔中HRP的量成比例。

2、经孵育后,未结合的生物素化酪胺通过洗涤去除。
 
3、洗涤去除未反应的生物素化酪胺后,加入信号扩增试剂II与复合物的多个生物素位点结合,此放大步骤可有效增加zui终参与催化TMB底物的HRP分子数量。

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