Elisa试剂盒检测抗生素的原理

氨基糖类、四环素类、喹诺酮类、硝基呋喃类等。目前国内外能够用ELISA办法检测的抗生素有：氯霉素、链霉素、四环素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、恩诺沙星、泰乐菌素、磺胺喹恶啉、磺胺二甲基嘧啶、盐霉素、磺胺类、阿维霉素、ELISA试剂盒检测成本低灵敏度高检测限一般能够达到定量要求，是一种抱负的初筛办法。

但由于ELISA办法存在必定的假阳性率，因而用美联免疫吸附法测定的阳性样品有必要做进一步的确认试验。
　　
现在已ELISA试剂盒检测为例介绍；本试剂盒适用于牛奶、肉类、鱼、虾、血清、及蜂蜜中的氯霉素残留量的测定。
　　
（一）测定原理
　　
测定的根底是抗原抗体放映。微孔板包被有针对兔IgG（氯霉素抗体）的羊抗体。参加氯霉素抗体、氯霉素符号物、规范或样品溶液、游离氯霉素与氯霉素酶符号物竞争氯霉素抗体，同时氯霉素抗体与羊抗体衔接。

没有衔接的酶符号物在洗刷步骤中被去除。将酶基质（过氧化尿素）和发色剂（四甲基联ben胺）参加到空中而且孵育。结合的酶符号物将无色的发色剂转化为蓝色的产品。参加反响停止液后使眼色由蓝色转变为黄色。在450nm处测量，吸收光强度与样品中的氯霉素浓度成正比
　　
（二）试剂盒目标
　　
特异性
　　
通过对形影的物质进行穿插反响性剖析得到
　　
氯霉素100%氯霉素碱0.5%甲砜霉素＜0.05%
　　
余四环霉素庆大霉素变暗霉素无穿插反响
　　
回收率
　　
牛奶＞80%鱼虾肉＞80%
　　
蜂蜜＞80%蛋类＞80%
　　
（三）供给的试剂
　　
1、96孔（12条*8孔）包被有氯霉素羊抗体。
　　
2、浓缩规范液；为氯霉素规范溶液。
　　
3、过氧化物酶符号的氯霉素浓缩液：0.7mL
　　
4、氯霉素抗体浓缩液0.7ml
　　
5、基质（7ml)含有氧化尿素
　　
6、四甲基联ben胺（TMB)30%过氧化氢，牛血清白蛋白，图文20等
　　
7、反响停止液1mol/L硫酸
　　
8、缓冲液1:100ml用于规范酶符号物抗体样品稀释
　　
9、缓冲液2：1ml,用于测定牛奶样品时的规范稀释用缓冲液