elisa试剂盒的选购与评价

elisa试剂盒是一种十分常用的定性定量方法，人体和动物、体外细胞培养中超过80％蛋白定量都使用其作为检测的手段。ELISA试剂盒价格一般非常昂贵，但各家试剂公司的质量却良莠不齐。ELISA的试剂盒有用于科研的，也有用于临床诊断的。应用于临床诊断的试剂盒必须有卫生部的许可文号，国家对应用于临床诊断的试剂盒有严格的规定和要求，制定相关的手则来管理试剂盒的质量。
而应用于科研的试剂盒，国家则没有出台相关的质量管理规定，因此试剂盒质量也就无法保障。在这种情况下，许多劣质的试剂盒在市面泛滥，不少同行战友为此浪费了大量的时间和金钱，却没有得到一个良好的实验结果。下面给战友们介绍一下如何判断试剂盒的质量，选购好的试剂盒。
一、仔细阅读说明书，对说明书的内容有一个详细的了解。
审查内容包括：
1. 试剂盒的名称：elisa试剂盒名称一般由“（物种）＋（测定指标）＋酶联免疫试剂盒（ELISA）”，物种和测定指标不能搞错，否则买错了就是你的事情；另外有的试剂盒说明书试剂盒名称明显与写在试剂盒上的名称不符，这要引起你的警惕。
2. 用途：应用于科研还是临床诊断，用于临床诊断的有卫生部的批准文号。
3. 测定原理：现在ELISA试剂盒除非是测定抗体的以外，一般使用的是双抗体夹心法，此种方法大多数用的是增强的双抗体夹心法，即使用生物素-亲和素系统，还有少数的指标可能使用竞争法，这类方法适用于半抗原的测定。具有复杂结构的多表位蛋白抗原，其双抗体夹心法中的一个抗体必须用单抗，否则背景很高。当然如果两个都是单抗（这两个单抗针对不同表位），那么测定的线性范围就较宽，试剂盒性能就较好；一个用单抗，一个用多抗，测定的灵敏度会较高。某些简单的化合物用ELISA测定时，因为没有两个或以上的表位，一般只能作为半抗原，只能用竞争法测定。如果你发现有测定简单化合物（如雌激素、NO等）用双抗体夹心法作测定原理时，这个试剂盒你就要怀疑了。另外还要说明一步双抗体夹心法与两步双抗体夹心法的区别。
一步双抗体夹心法的吸光度-剂量曲线呈钟形，随着待则标本中抗原浓度的增加而升高至一定程度后，测定吸光度即随抗原浓度的增加而开始下降直至不显色，即所谓的“钩状效应”(hook eHect)，也就是我们在免疫沉淀试验中所称的“带现象”(zone phenomenon)。所以当使用一步双抗体夹心法时，样品浓度太高，有时会出现测不出来的现象，此时要作适当的稀释才能准确测定。
4. elisa试剂盒的组成：用双抗体夹心法作为测定的方法时，试剂盒的组成一般包括：
已包被单抗的酶标板：一块，有96孔的，也有48孔的，可拆缷，外面有铝箔袋密封，打开后有干燥剂，实验时暂未使用的酶标条要连带干燥剂密封好，放在4℃冰箱中妥善保存。