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一文教会您如何做 MTT 实验
人阅读 发布时间:2020-04-27 16:08
活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在 490nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT 结晶形成的量与细胞数成正比。
该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高。
实验步骤:
1. 收集对数期细胞
2. 酶消化
3. 血球计数板计
4. 换液
5. 加MTT固定,孵育
6. 加DMSO,振荡
7. 测OD值
结果示意图:
温馨提醒:
1. 需对数期细胞
2. 提供实验分组,试剂刺激细胞时间和使用浓度
我们提供:
1. 实验报告,包括实验材料、方法、步骤和实验结果
2. 原始数据,包括OD值和折线图