ELISA试剂盒的定量联系

现在常用的几种ELISA试剂盒办法有：测定抗体的直接法，测定抗原的双抗体夹心法和测定抗原的竞争法等。本实验选用直接法测定单克隆抗体效价。其主要进程为：首先将已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反响板的凹孔内，加待测抗体，保温后洗刷以除去未联系的杂蛋白质，加酶标抗抗体，保温后洗刷，加底物保温30分钟后，加酸或碱停止酶促反响，用目测或光电比色测定抗体含量。
ELISA试剂盒是以免疫学反响为根底，将抗原、抗体的特异性反响与酶对底物的高效催化作用相联系起来的一种敏感性很高的实验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上，构成酶标抗体/酶标抗原，称为酶联系物。该酶联系物的酶在免疫反响后，作用于底物使之呈色，依据色彩的有无和深浅，定位或定量抗原/抗体。
ELISA试剂盒法是免疫酶技术的一种，其特点是使用聚苯乙烯微量反响板（或球）吸附抗原/抗体，使之固相化，免疫反响和酶促反响都在其间进行。在每次反响后都要重复洗刷，这既确保了反响，也避免了末反响的游离抗体/抗原的别离步骤。在ELISA试剂盒法中.酶促反响只进行一次，而抗原、抗体的免疫反响可进行一次或数次，即可用二抗（抗抗体）、三抗再次进行免疫反响。