ELISA试剂盒的操作步骤如下

ELISA试剂盒亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中获取。分子量60kD，每个分子由4个亚基构成，能够和4个生物素分子密切联系。如今使用更多的是从链霉菌中获取的链霉亲和 素。生物素又称维生素H，分子量244.31，存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，ELISA试剂盒生物素-羟 基琥珀亚胺酯(BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的巨细分子构成生物素化的产品。亲和素与生物素的联系，虽不属免疫反响，但特异性强，亲和力大， 两者一经联系就极为安稳。因为1个亲和素分子有4个生物素分子的联系方位，能够衔接更多的生物素化的分子，构成一种类似晶格的复合体。因而把亲和素和生物 素与ELISA偶联起来，就可大大提高ELISA试剂盒的敏感度。
ELISA试剂盒因而联系于固相的酶标抗原量与ELISA试剂盒受检抗原的量成反比。
(1)将特异抗体与固相载体衔接，构成固相抗体。洗刷。
(2) 待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反响。如受检标本中无抗原，则酶标抗原能顺畅地与固相抗体联系。如受检标本中含有抗原，则 与酶标抗原以相同的时机与固相抗体联系，竞争性地占去了酶标抗原与固相载体联系的时机，使酶标抗原与固相载体的联系量削减。参阅管中只加酶标抗原，保温 后，酶标抗原与固相抗体的联系可达充沛的量。洗刷。
(3)加底物显色：参阅管中因为联系的酶标抗原多，ELISA试剂盒故色彩深。参阅管色彩深度与待测管色彩深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管色彩越淡，表明标本中抗原含量越多。