鸡甲状腺素(T4)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T
3µg/L - 80µg/L
使用目的：
本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中甲状腺素(T4)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡甲状腺素(T4)
。用纯化的鸡甲状腺素(T4)
抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲状腺素 (T4)，再与  HRP
标记的甲状腺素 (T4)抗体    ，形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物
TMB 显色。TMB 在 HRP  酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜
色的深浅和样品中的甲状腺素(T4)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），
通过标准曲线计算样品中鸡甲状腺素(T4)浓度。
试剂盒组成

标本要
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因   NaN3抑制辣根过
（HRP）活性。
操作步骤
1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。

2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后37℃温育30分钟。30倍稀释后备用
4.配液：将 30倍浓
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静重复 5次，拍干。
30秒后弃去，如此
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液    50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15分钟以内进行。
操作程序总：

计算
以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，在坐标纸上，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与  OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，